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凝胶的种类及性质

(一）交联葡聚糖凝胶(Sephadex)

(1)Sephadex G交联葡聚糖的商品名为Sephndex，不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如，G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克，同样G-200克每克千胶吸水20克。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，G-150，和G-200。因此，“G”反映，凝胶的交联程度，膨胀程度及分部范围。(2)Sephadex LH-20，是—Sephadex G-25的羧丙基衍生物，能溶于水及亲脂溶剂，用于分离不溶于水的物质。

(二)琼脂糖凝胶:

商品名很多，常见的有，Sepharose(瑞典，pharmacia ) ，Bio-Gel-A（美国Bio-Rad)等。琼脂糖凝胶是依靠糖链之间的次级链如氢键来维持网状结构，网状结构的疏密依靠琼脂糖的浓度。一般情况下，它的结构是稳定的，可以在许多条件下使用(如水，pH4-9范围内的盐溶液）。琼脂糖凝胶在40℃以上开始融化，也不能高压消毒，可用化学灭菌活处理。

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凝胶的种类及性质

聚酰胺凝胶:

是一种人工合成凝胶，是以酰胺为单位，由甲叉双酰胺交联成的，经干燥粉碎或加工成形制成粒状，控制交联剂的用量可制成各种型号的凝胶。交联剂越多，孔隙越小。

聚酰胺凝胶的商品为生物胶一P(Bio-GelP)，由美国Bio-Rod厂生产，型号很多，从P-2至P-300共10种，Р后面的数字再乘1000就相当于该凝胶的排阻限度。

聚凝胶商品为Styrogel ，具有大网孔结构，可用于分离分子量1600到40，000，000的生物大分子，适用于有机多聚物，分子量测定和脂溶性天然物的分级，凝胶机械强度好，洗脱剂可用亚矾。

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凝胶的样品溶液的处理

样品溶液如有沉淀应过滤或离心除去，如含脂类可高速离心或通过Sephadex G-15短柱除去。样品的粘度不可大，含蛋白为超过4%，粘度高影响分离效果。上柱样品液的体积根据凝胶床体积的分离要求确定。分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4%(一般约0.5-2ml)，进行分族分离时样品液可为凝胶床的10%，在蛋白质溶液除盐时，样品可达凝胶床的20-30%。分级分离样品体积要小，使样品层尽可能窄，洗脱出的峰形较好。

防止微生物的污染交联葡聚糖和琼脂糖都是多糖类物质，防止微生物的生长，在凝胶层析中十分重要，常用的抑菌剂有:

1)叠氨钠(NaN3）在凝胶层析中只要用0.02%叠氮钠已足够防止微生物的生长，叠氮钠易溶一水，在20℃时约为40%;它不与蛋白质或碳水化合物相互作用，因此叠氮钠不影响活力;不会改变蛋白质和碳水化合物的层析我特性。叠氮钠可干扰荧光标记蛋白质。2可乐酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]在凝胶层析中使用浓度为0.01-0.02%。在微酸性溶液中它的杀菌效果较好，在强碱性溶液中或温度高于60℃时易引起分解而失效。

3)代疏基水杨酸钠在凝胶层析中作为抑菌剂使用浓度为0.05-0.01%。在微酸性溶液中为有效。***离子可使代疏基的物质结合，因而包含疏基的蛋白质可在不同程度上降低它的抑菌效果。

(4)代盐在凝胶层析中使用浓度为0.001-0.01%。在微碱性溶液中抑效果，长时间放置时可与卤素、根离子作用而产生沉淀;还原剂可引起此化合物分解:含疏基的物质亦可降低或***它的抑菌作用。

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